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Projets de Recherche

Évaluation de l’application des protocoles de vaccination chez les chirurgiens-dentistes.

Description :

Méthodologie : Janvier 2020 1- Une enquête portant sur un échantillon national de 600 dentistes représentatif de la population des dentistes permettra d’analyser l’« état des lieux » concernant ces vaccins dans une première étape. Ci-dessus les différents vaccins sujets à l’évaluation. (OMS) Description de l’échantillon : - La population des chirurgiens-dentistes répartis sur tout le territoire Libanais (600) - Critères d’inclusion : Tout Chirurgien-dentiste sur le territoire Libanais pratiquant sa profession (en tenant compte d’un échantillonnage selon l’expérience professionnelle, l’âge, le sexe ainsi que la répartition géographique). - Critères d’exclusion : Les Chirurgiens-Dentistes qui présentent une contre-indication à la vaccination : exemple : Les CD atteints de sclérose en plaque ou de maladies auto-immunes. - Recrutement : Les CDs dans les 3 Universités nationales, les Sociétés savantes, l’Ordre des dentistes et au cours des manifestations scientifiques nationales. - Un questionnaire détaillé permettant de répertorier la pertinence, le timing des protocoles existants actuellement sera dûment rempli (Annexe 1). 2- Avril 2020 : Une deuxième phase de l’étude visera à cibler une sous-population de 200 dentistes sur lesquels les anticorps dirigés spécifiquement contre les Antigènes Hbs seront testés, suite à une prise de sang, car l’hépatite B représente un risque d’infection majeur chez le chirurgien-dentiste. Une lettre de consentement éclairé sera signée par les chirurgiens-dentistes faisant partie de cette phase de l’étude. (Annexe 2) Matériel et méthode : Le technicien de laboratoire prépare les tubes pour recueillir le sang, il pose ensuite un garrot pour stopper momentanément la circulation sanguine pour faire le prélèvement au niveau du pli interne du coude avec une aiguille sur laquelle le tube est positionné enfin le tube sera étiqueté au nom du patient. Dans le cas de titrage des anticorps contre l’hépatite B, on a besoin d’environ 2cc de sang Le choix de l’échantillon réduit se fera selon la disponibilité des chirurgiens-dentistes en respectant la distribution initiale. Modalité de prise de sang : Laboratoire de la faculté. Les analyses se feront dans un centre hospitalo-universitaire Caractéristiques Les anticorps anti‑HBs sont des anticorps spécifiques, généralement de type IgG, dirigés contre l’antigène de surface de l’hépatite B (Ag HBs). Ils peuvent être détectés plusieurs semaines après la disparition de l'antigène de surface de l'hépatite B et se former après une hépatite B ou une vaccination contre l’hépatite B. Les anticorps se forment contre le déterminant antigénique a de l’Ag HBs, qui est commun à tous les sous‑types, et contre les déterminants antigéniques spécifiques des sous‑types. Dans le cadre de la vaccination contre l’hépatite B, les tests anti‑HBs permettent de vérifier la nécessité de la vaccination et de s’assurer de son succès Principe -Principe de titrage des Anti-corps anti-Hbs. Un Test Immunologique permettra de déterminer quantitativement in vitro des anticorps humains dirigés contre l’antigène de surface du virus de l’hépatite B (Ag HBs) dans le sérum et le plasma humains. Dans le cadre de la vaccination contre l’hépatite B, les tests anti-HBs permettent de vérifier la nécessité de la vaccination et de s’assurer de son succès. Par ailleurs, les tests anti-HBs sont utilisés pour le suivi thérapeutique d’une d’hépatite B aiguë. Ce test n’est pas destiné à des fins diagnostiques. Ce test par électrochimiluminescence « ECLIA » s’utilise sur les systèmes d'immunoanalyse cobase. -Méthode « sandwich ». Durée totale du cycle analytique : 18 minutes 1ère incubation : Les anticorps anti‑HBs de l'échantillon (40 µL) sont mis en présence d’Ag HBs (ad/ay) biotinylé et d’Ag HBs (ad/ay) marqué au ruthéniuma). Il se forme un « sandwich ». 2ème incubation : les microparticules tapissées de streptavidine sont ajoutées dans la cuvette réactionnelle. Le complexe immun est fixé à la phase solide par une liaison streptavidine-biotine. Le mélange réactionnel est transféré dans la cellule de mesure, les microparticules sont maintenues au niveau de l’électrode par un aimant. L’élimination de la fraction libre est effectuée par le passage de ProCell ou ProCell M. Une différence de potentiel appliquée à l’électrode déclenche la production de luminescence qui est mesurée par un photomultiplicateur. Les résultats sont obtenus à l’aide d’une courbe de calibration. Celle-ci est générée, pour l’analyseur utilisé, par une calibration en 2 points et une courbe de référence mémorisée dans l'étiquette code-barres ou le e-code-barres du réactif. Les calibrateurs (A‑HBS II Cal1 et A‑HBS II Cal2) sont préparés uniquement à partir de sang de donneurs où la recherche de l’antigène HBs et des anticorps anti‑VHC et anti‑VIH conduit à un résultat négatif. Les méthodes de dépistage utilisent des tests approuvés par la FDA ou conformes à la Directive européenne 98/79/CE, Annexe II, liste A. Avant le marquage à la biotine ou au ruthénium, le matériau Ag HBs de départ est inactivé par la chaleur à une température de 60 °C maintenue pendant 15 heures. Cependant, comme le risque d’infection ne peut être exclu avec certitude par aucune méthode, y compris l'inactivation, ce produit doit être traité avec le même soin que les échantillons de patients. Les réactifs contenus dans le coffret sont prêts à l’emploi dans des flacons adaptés aux analyseurs. Les calibrateurs ne doivent rester sur l’analyseur que durant la calibration entre 20 et 25 °C. Si les calibrateurs prêts à l'emploi ne sont pas entièrement utilisés pour la calibration, les fractionner en aliquotes dans des godets vides à bouchon. Toutes les informations nécessaires au déroulement du test sont mémorisées sur le code-barres des flacons de réactifs et doivent être saisies. Réalisation du test Pour garantir le bon fonctionnement du test, l’analyseur effectue automatiquement l’homogénéisation des microparticules. Les paramètres spécifiques du test mémorisés dans le codebarres sont saisis. L’analyseur gère le contrôle de la température. Toutes les informations nécessaires à la calibration du test sont lues automatiquement par l'analyseur. Après la calibration, les calibrateurs sont replacés au réfrigérateur (entre 2 et 8 °C). Calcul des résultats L’analyseur calcule automatiquement la concentration en analyse de chaque échantillon. Les résultats sont exprimés en UI/L. Interprétation des résultats Les stratégies de vaccination utilisées pour certains groupes à risque se basent sur le titre d'anticorps anti‑HBs mesuré. Différentes recommandations sont proposées par les autorités compétentes selon les régions et les pays concernés. Spécificité analytique Pas de réactions croisées avec VHA, VHC, VHE, CMV, VEB, VIH, le virus de la rubéole, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, l'arthrite rhumatoïde, les maladies auto‑immunes ou les affections hépatiques alcooliques. Facteurs étudiés : 1. Screening de la Vaccination des CD contre les maladies à risque. 2. Screening des CD atteints de ces maladies (vaccines ou non). 3. Evaluer la volonté des CD à appliquer ces protocoles suite à l’analyse de la corrélation entre les résultats du questionnaire et des tests sanguins. 4. Pourcentage des CD immunisés contre l’hépatite B. Statistiques (Juin 2020) Le logiciel statistique SPSS for Windows version 24.0 sera utilisé pour l’analyse statistique des données. Le seuil de signification retenu correspond à pvalue<0.05. Les effectifs et les pourcentages seront utilisées pour décrire les variables qualitatives. Les moyennes et les écarts-types seront utilisés pour la décrire les variables quantitatives.  Les tests de Kolmogorov-Smirnov seront utilisés pour évaluer la normalité de distribution des variables quantitatives. Les tests de Chi-Deux seront utilisés pour la comparaison des pourcentages. Les tests de Student ou leurs équivalents non paramétriques (tests de Mann-Whitney) seront menées pour comparer les variables quantitatives entre deux groupes. Les analyses de variance ou leurs équivalents non paramétriques les tests de Kruskal Wallis seront utilisés pour comparer les variables quantitatives entre 3 groupes. Les coefficients de corrélation de Pearson et de Spearman seront calculés pour évaluer la liaison entre les variables quantitatives. Les analyses univariées seront suivies par des modèles multivariées type régression logistique et régression multiple; les variables explicatives incluses dans le modèle sont celles ayant un pvalue <0.200 dans l’analyse univariée. Le principe de collinearité sera évalué en n’incluant pas dans le même modèle des variables explicatives fortement corrélées entre elles. Analyse des Résultats : Mai 2021 Rédaction des résultats et Discussion : Septembre 2021 Rédaction de la thèse : Janvier 2022 Publication des articles : Février-Juin 2022.

Titulaire :
YOUNES Ronald

Contact USJ :
ronald.younes@usj.edu.lb

Chercheur(s) :


Projet présenté au CR, le : 01/10/2019

Projet achevé auprès du CR : 30/09/2022